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催乳素(PRL)放免檢測服務(wù)現(xiàn)貨供應(yīng),PRL放免實驗代測

點擊次數(shù):935     更新時間:2019-11-28

催乳素(PRL)放免檢測服務(wù)現(xiàn)貨供應(yīng),PRL放免實驗代測

催乳素是由垂體前葉分泌的蛋白激素,分子量為 2200dt。在雌激素、孕激素、皮質(zhì)類固 醇作用的基礎(chǔ)上,催乳素對泌乳的開始和維持起著重要作用,娠后血清催乳素逐漸增 加,至分娩前達到高峰,哺乳期進一步增加,催乳素的測定,對診斷垂體疾病,如垂體 瘤和泌乳綜合癥的診斷有重要價值,對月經(jīng)異常和不孕癥的診斷有重要意義。

本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理:含催乳素(PRL)的樣品 和 125I 標記的催乳素(PRL)與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG,使免疫復(fù)合物沉淀,離心,測沉淀放射性計數(shù)。通過標準曲線得到樣本中催乳素 (PRL)的濃度。

本試劑盒標準品濃度采用 WHO 1st IRP75/504,與 WHO2nd IS83/562 的換算關(guān)系為: 1ng/ml(1st IRP)=21mIU/ml(2nd IS83/562)

2、 質(zhì)控血清:兩瓶,1.0 ml/瓶 濃度為: L:9.89±2.73 ng/ml H:50.08±10.07ng/ml

3、抗 PRL 抗體: 一瓶,綠色溶液,2~8℃冷存。

4、 125I-PRL: 一瓶,< 88.23 kBq/瓶,紅色溶液,2~8℃冷存。

5、 分離劑:一瓶,藍色溶液,充分搖勻后使用,2~8℃冷存。

[儀器] 1、 γ-計數(shù)器 2、低溫離心機

操作方法 I

1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進行操作;

2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號,所有實驗均做雙管重復(fù);

3、 取每個濃度的標準品、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號的試管中;

4、 每管均各加入 200µl 標記物工作液;

5、 每管均各加入 200µl 抗體工作液,充分混勻;

6、 37℃溫育 180 分鐘;

7、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻;

8、 室溫放置 5~10 分鐘后,離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;

9、用 γ-計數(shù)器測定各管計數(shù)CPM. 檢測時間: 1 分鐘

10、從標準曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。

[實驗過程中應(yīng)注意] 1、 γ-計數(shù)器本底計數(shù)應(yīng)≤100CPM/分,效率應(yīng)≥75%;

2、 加入放射性標記物時,應(yīng)做好防護、小心謹慎,以避免造成放射性污染;

3、 如果某一個樣本的測定值高于高濃度的標準品濃度,用零標準品以 1:2 或 1: 4 的比例稀釋樣本后重新測試,測試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

[質(zhì)量控制] 每次實驗操作應(yīng)至少采用兩個濃度的質(zhì)控血清進行質(zhì)量控制,以確保每次實驗測定結(jié)果 的可靠性。

1、 質(zhì)控血清的平均值應(yīng)在允許范圍內(nèi);

2、 曲線方程應(yīng)采用佳擬合方式;

3、 重復(fù)樣本的測定結(jié)果相差在 15%以內(nèi)。 如不能同時滿足以上條件,則此次試驗結(jié)果無效,全部試驗需重新進行。

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