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  很多科研工作者都會(huì)使用人類(lèi)樣本進(jìn)行科學(xué)研究，樣本因獲取不易而珍貴無(wú)比。珍惜人類(lèi)樣本，需從樣本處理開(kāi)始。以下的一些樣本處理技巧，或許可以幫助您，消除實(shí)驗(yàn)中的干擾物質(zhì)。

一：多次磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌

  磷酸鹽緩沖液（PBS）幾乎深得所分子生物學(xué)家的喜愛(ài)，因?yàn)镻BS通常不會(huì)裂解或損壞細(xì)胞，同時(shí)允許重復(fù)洗滌。

  如何使用：如果你想要的組織被覆蓋在血液中，用30-40mL冷PBS洗滌并輕輕搖動(dòng)。將剩余的大部分組織轉(zhuǎn)移到新的EP管中，用于后續(xù)洗滌（每次洗滌都將增加細(xì)胞得產(chǎn)量）。幾次洗滌后，的組織將沒(méi)有血液和基質(zhì)細(xì)胞。如果您想捕獲非粘連組織或細(xì)胞，請(qǐng)記住保存并離心用于洗滌的每個(gè)PBS管。

  注意：使用PBS洗滌zui適用于上皮細(xì)胞的分離。洗滌也可以用來(lái)溫和地去除粘附在您感興趣的組織上的基質(zhì)細(xì)胞。

二：通過(guò)預(yù)包被板分離目標(biāo)細(xì)胞

   不同的細(xì)胞對(duì)胞外基質(zhì)蛋白或類(lèi)似化合物具有不同的親和力。由于不同的粘附力，您可以快速，輕松將細(xì)胞系和預(yù)包被板共孵育，去除未結(jié)合細(xì)胞，從而分離目標(biāo)細(xì)胞。膠原蛋白（用于上皮細(xì)胞）或多聚賴(lài)氨酸（用于多種細(xì)胞類(lèi)型）就是很好的預(yù)包被材料。

  注意：您需要事先評(píng)估目標(biāo)細(xì)胞是否與底物相互作用（例如，一些細(xì)胞系能優(yōu)先附著多聚賴(lài)氨酸，因?yàn)樗鼈儺a(chǎn)生指向多聚賴(lài)氨酸的蛋白酶）。

三：利用特異性染色檢查細(xì)胞純度

  您可以使用高度特異性標(biāo)記物，如上皮細(xì)胞標(biāo)記物—E-鈣粘蛋白或其他細(xì)胞類(lèi)型來(lái)檢查細(xì)胞純度。一旦細(xì)胞群以上述方式大規(guī)模純化后，再通過(guò)常規(guī)染色方法驗(yàn)證小的亞群。您可以通過(guò)顯微鏡或使用可用肉眼看到的顯色底物來(lái)觀(guān)察情況。

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