信帆生物為您提供：人前列腺素E2試劑盒的操作原理及樣本處理方法
更新時(shí)間：2018-05-14 點(diǎn)擊次數(shù)：1421次?信帆生物為您提供：人前列腺素E2試劑盒的操作原理及樣本處理方法！信帆生物代理銷售人前列腺素E2（PGE2)elisa試劑盒，受到很多客戶的*，提供技術(shù)指導(dǎo)和售后服務(wù)，歡迎大家！
前列腺素的生理作用
（1）對(duì)生殖系統(tǒng)作用：作用于下丘腦的黃體生成素釋放激素的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，增加黃體生成素釋放激素的釋放，再刺激垂體前葉黃體生成素和卵泡刺激素分泌，從而使激素分泌增加。前列腺素也能直接刺激間質(zhì)細(xì)胞分泌?？稍黾哟笫笾亓俊⒑颂呛怂岷?、透明質(zhì)酸酶活性和精數(shù)量，增加精活動(dòng)。前列腺素維持雄性生殖器官平滑肌收縮，被認(rèn)為與精作用有關(guān)。精中PG使子宮頸肌松弛，促進(jìn)精在雌性動(dòng)物生殖道中運(yùn)行，有利于受精。但大量前列腺素，對(duì)雄性生殖機(jī)能卻有抑制作用。
（2）對(duì)血管和支氣管平滑肌的作用：不同的前列腺素對(duì)血管平滑肌和支氣管平滑肌的作用效應(yīng)不同。前列腺素E和前列腺素F能使血管平滑肌松弛，從而減少血流的外周阻力，降低血壓。
（3）對(duì)胃腸道的作用：可引起平滑肌收縮，抑制胃酸分泌，防止強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、*等對(duì)胃粘膜侵蝕，具有細(xì)胞保護(hù)作用。對(duì)小腸、結(jié)腸、胰腺等也具保護(hù)作用。還可刺激腸液分泌、肝膽汁分泌，以及膽囊肌收縮等。
（4）對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)作用：前列腺素廣泛分布于神經(jīng)系統(tǒng)，對(duì)神經(jīng)傳遞質(zhì)的釋放和活動(dòng)起調(diào)節(jié)作用，也有人認(rèn)為，前列腺素本身即有神經(jīng)傳遞質(zhì)作用。
（5）對(duì)呼吸系統(tǒng)作用：前列腺素E2和I2有松弛支氣管平滑肌作用，而前列腺素F2α則相反，是支氣管收縮劑。
（6）對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)的作用：通過影響內(nèi)分泌細(xì)胞內(nèi)環(huán)腺苷酸（CAMP）高低水平，來影響激素的合成與釋放。如促使素分泌和腎上腺皮質(zhì)激素的合成。也通過降低靶器官的CAMP水平，而使激素作用降低。
信帆生物為您提供：人前列腺素E2試劑盒的操作原理及樣本處理方法！操作原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人前列腺素E2（PGE2)水平。用純化的人前列腺素E2（PGE2)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中 依次加入前列腺素E2（PGE2)，再與 HRP 標(biāo)記的前列腺素E2（PGE2)抗 體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的前列腺素E2（PGE2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo) 準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人前列腺素E2（PGE2)濃度。
試劑盒樣本處理方法：
在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的，好-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
培養(yǎng)細(xì)胞：檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
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