信帆生物銷售植物α-淀粉酶！
更新時間：2019-12-02 點擊次數(shù)：1065次信帆生物銷售部植物α-淀粉酶！
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測定意義：
淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉，包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵，生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖，同時使淀粉的粘度降低，因此又稱為液化酶。
測定原理：
還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。β-淀粉酶不耐熱，在70℃鈍化15min，從而測定α-淀粉酶活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：25mL×1瓶，常溫保存，若有黃色晶體析出，需加熱溶解后再用；
試劑二：20mL×1瓶，4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣本，加0.8mL蒸餾水勻漿；勻漿后在室溫下放置提取15min，每隔5min振蕩1次，使其充分提取；3000g，常溫離心10min，吸取上清液并且加蒸餾水定容至10 mL，搖勻，即為淀粉酶原液。
操作步驟和加樣表（在1.5mLEP管中依次加入下列試劑）：
1、β-淀粉酶滅活：
試劑（μL） | 對照管 | 測定管 |
α?淀粉酶原液 | 250 | 250 |
70℃水浴15min左右，冷卻
2、加入試劑一并且保溫：
試劑一 | 500 |
|
將以上對照管、測定管和試劑二置于40℃恒溫水浴中保溫10min左右
3、準(zhǔn)確反應(yīng)5min
試劑二 | 250 | 250 |
在40℃恒溫水浴中準(zhǔn)確保溫5min
4、加入試劑一，并且混勻
試劑一 |
| 500 |
混勻，室溫靜置10min，蒸餾水調(diào)零，540nm處讀取對照管和測定管吸光度，分別記為A1和A2。
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